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熒光分光光度計同一樣品多次測量為什么峰值不同?

時間:2024-10-11瀏覽次數:4次

使用熒光分光度計掃描樣品出現峰值不同主要有以下幾點原因:

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  1. 儀器穩定性問題

    • 光源穩定性熒光分光光度計的光源(如氙燈)在長時間使用過程中,其光強可能會發生變化。如果光源的能量輸出不穩定,會導致檢測到的熒光強度發生波動。例如,氙燈隨著使用時間的增加,其發射的光強可能會逐漸減弱,使得相同樣品在相同波長下的熒光峰值降低。

    1. 光電倍增管穩定性:光電倍增管是用于檢測熒光信號并將其轉換為電信號的部件。其性能也會受到環境因素(如溫度、濕度)和自身老化等因素的影響。當光電倍增管的增益發生變化時,會對檢測到的熒光信號產生放大或縮小的作用,從而導致峰值不同。例如,溫度升高可能會使光電倍增管的噪聲增加,信號檢測的準確性下降,使得測量的熒光峰值出現偏差。


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  2. 樣品自身性質變化

    • 光化學分解:一些熒光物質在受到激發光照射時,可能會發生光化學反應,導致其化學結構發生改變,從而影響熒光強度。例如,某些含有共軛雙鍵的有機化合物在長時間光照下,雙鍵可能會斷裂,使得熒光發色團被破壞,熒光強度降低,峰值減小。

    • 濃度變化:如果樣品在測量過程中有溶劑揮發等情況,會導致樣品濃度發生變化。熒光強度與樣品濃度在一定范圍內是成正比的,當濃度改變時,熒光峰值也會相應地改變。比如,一個含有熒光染料的水溶液在掃描過程中,由于溶劑水的揮發,染料濃度升高,熒光峰值就會增大。


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  3. 測量條件差異

    • 溫度影響:溫度會對熒光物質的熒光量子產率產生影響。一般來說,溫度升高,熒光量子產率可能會降低。例如,對于某些稀土配合物熒光材料,溫度每升高 10℃,熒光強度可能會下降 10% - 20% 左右。如果在多次測量過程中,樣品的溫度控制不好,就會導致熒光峰值出現差異。

    • 溶液攪拌情況:如果樣品溶液沒有充分攪拌均勻,在掃描過程中,熒光物質的分布可能不均勻。這樣會導致每次測量時檢測區域內的熒光物質濃度不同,從而使熒光峰值不同。例如,在測量含有沉淀的熒光樣品溶液時,如果不攪拌,沉淀可能會影響局部熒光物質的濃度,使得測量的熒光峰值不穩定。



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